Polyklonaler Kaninchen-Anti-Phosphothreonin-Antikörper, Biotin
Einführung
Proteinkinasen übertragen Phosphatgruppen von ATP auf Serin-, Threonin- oder Tyrosinreste auf Proteinpeptidsubstraten, wodurch die Aktivität und Funktion des Ziels direkt beeinflusst werden. Studien mit radioaktiven Markierungen deuten darauf hin, dass etwa 30 % der Proteine in eukaryotischen Zellen einer Phosphorylierung unterliegen.1, 2 Diese entscheidende posttranslationale Modifikation reguliert ein breites Spektrum zellulärer Aktivitäten, einschließlich des Zellzyklus, der Differenzierung, des Stoffwechsels und der neuronalen Kommunikation.
Außerdem sind abnormale Phosphorylierungsereignisse an vielen Krankheitszuständen beteiligt. Bei der Bewertung der Phosphorylierung kann die Methode der Wahl in Abhängigkeit von vielen Faktoren variieren, einschließlich der spezifischen Fragestellung und der Verfügbarkeit von Spezialgeräten oder Reagenzien. Diese Übersicht enthält eine kurze Beschreibung mehrerer derzeit verwendeter Methoden und geht auf einige der damit verbundenen Vor- und Nachteile ein.
Kinase-Aktivitäts-Assays
Proteinkinasen sind häufig gemeinsame Elemente in mehreren Signalnetzwerken, die zahlreiche nachgeschaltete Effektoren beeinflussen, die für eine biologische Reaktion verantwortlich sind.
- Daher kann die Bestimmung der Aktivität einer einzelnen spezifischen Kinase wertvolle Informationen über parallele Wege liefern.3 Die Kinaseaktivität in einer biologischen Probe wird üblicherweise in vitro durch Inkubation der immunpräzipitierten Kinase mit einem exogenen Substrat in Gegenwart von ATP gemessen.
- Die Messung des phosphorylierten Substrats durch eine spezifische Kinase kann mit mehreren Reportersystemen bewertet werden, einschließlich kolorimetrischer (Abbildung 1), radioaktiver oder fluorometrischer Detektion.4 Darüber hinaus bietet R&D Systems ein nicht-radioaktives Universal Kinase Activity Kit an, das die Quantifizierung von Kinase ermöglicht Aktivität für jede Kinase, die ADP produziert.
- Obwohl Informationen über die Wirkungen einer bestimmten Kinase erhalten werden können, bietet die Bewertung der Enzymaktivität in Zellextrakten nur einen Einblick in die Signallandschaft. Über die modifizierten Proteine wird wenig offenbart, und In-vitro-Aktivitätsassays gehen nicht auf die Rolle einer potenziellen endogenen Phosphataseaktivität ein.
- Der direkte Nachweis von phosphorylierten Proteinen kann eine detailliertere Analyse der zellulären Reaktion auf einen externen Stimulus liefern, da die Identifizierung eines Phosphopeptids Informationen über die Expression und den funktionellen Zustand dieses Proteins liefert.
Phosphospezifische Antikörperentwicklung
Eine klassische Methode zur direkten Messung der Proteinphosphorylierung umfasst die Inkubation ganzer Zellen mit radioaktiv markiertem 32P-Orthophosphat, die Gewinnung von Zellextrakten, die Trennung von Proteinen durch SDS-PAGE und die Belichtung mit Film.2, 5 Diese arbeitsintensive Methode erfordert viele Multi -Stunden-Inkubationen und die Verwendung von Radioisotopen. Andere traditionelle Methoden umfassen die zweidimensionale Gelelektrophorese, eine Technik, die davon ausgeht, dass die Phosphorylierung die Mobilität und den isoelektrischen Punkt des Proteins verändert.
- Angesichts dieser aufwändigen Methoden war die Entwicklung von phosphorylierungsabhängigen Antikörpern ein willkommenes Ereignis für die Forscher. 1981 wurde der erste dokumentierte Phospho-Antikörper in Kaninchen produziert, die mit Benzonylphosphonat, konjugiert an Keyhole-Limpet-Hämocyanin (KLH), immunisiert wurden.
- Dieser Antikörper erkannte weitgehend Proteine, die Phosphotyrosin enthielten.6 Zehn Jahre später wurden Phosphorylierungsstatus-spezifische (Phospho-spezifische) Antikörper entwickelt, indem Kaninchen mit synthetischen Phosphopeptiden immunisiert wurden, die die Aminosäuresequenz darstellen, die die Phosphorylierungsstelle des Zielproteins umgibt.7
- Das Immunserum war auf eine Peptidaffinitätssäule aufgetragen, um ein hochspezifisches Immunreagens zu erzeugen. Die Verfügbarkeit von Phospho-spezifischen Antikörpern hat die Tür für die Verbesserung traditioneller Methoden sowie für die Entwicklung neuer Immunoassay-Techniken geöffnet (Phospho-spezifische Antikörper anzeigen).
- Der Hauptvorbehalt bei der Verwendung phosphospezifischer Antikörper in jeder Technik besteht darin, dass ein erfolgreicher Nachweis von der Spezifität und Affinität des Antikörpers für das interessierende Phosphoprotein abhängt.
Westlicher Fleck
Der Western Blot ist die gebräuchlichste Methode zur Bestimmung des Phosphorylierungszustands eines Proteins, und die meisten zellbiologischen Labors verfügen über die notwendige Ausrüstung, um diese Experimente durchzuführen. Nach Trennung der biologischen Probe mit SDS-PAGE und anschließender Übertragung auf eine Membran (normalerweise PVDF oder Nitrocellulose) kann ein phosphospezifischer Antikörper verwendet werden, um das interessierende Protein zu identifizieren (Phospho-spezifische Antikörper für die Western-Blot-Analyse anzeigen). Das typische Western-Blot-Protokoll eliminiert die Gefahren und Abfallentsorgungsanforderungen, die mit der Verwendung von Radioisotopen verbunden sind. Viele Phospho-spezifische Antikörper sind ziemlich empfindlich und können das phosphorylierte Protein in einer Routineprobe (z. B. 10–30 &mgr;g Ganzzellextrakt) leicht nachweisen. Da sich die gemessenen Spiegel eines Phosphoproteins mit der Behandlung oder durch Gelladefehler ändern können, verwenden Forscher oft einen Antikörper, der den Gesamtspiegel des verwandten Proteins (unabhängig vom Phosphorylierungszustand) nachweist, um den phosphorylierten Anteil im Verhältnis zum Gesamtanteil zu bestimmen und als interne Ladekontrolle dienen . Sowohl Chemilumineszenz- als auch kolorimetrische Nachweisverfahren sind üblich, und Molekulargewichtsmarker werden im Allgemeinen auch verwendet, um Informationen über die Proteinmasse bereitzustellen.
Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA)
Der ELISA ist zu einer leistungsfähigen Methode zur Messung der Proteinphosphorylierung geworden. ELISAs sind quantitativer als Western Blotting und zeigen einen großen Nutzen in Studien, die Kinaseaktivität und -funktion modulieren. Das Format für diesen auf Mikroplatten basierenden Assay verwendet typischerweise einen für das gewünschte Protein spezifischen Einfangantikörper, unabhängig vom Phosphorylierungszustand. Das Zielprotein, entweder gereinigt oder als Komponente in einer komplexen heterogenen Probe wie einem Zelllysat, wird dann an die Antikörper-beschichtete Platte gebunden. Anschließend wird ein für die zu analysierende Phosphorylierungsstelle spezifischer Nachweisantikörper zugegeben. Diese Assays werden typischerweise unter Verwendung einer kolorimetrischen oder fluorometrischen Detektion entwickelt. Die Intensität des resultierenden Signals ist direkt proportional zur Konzentration des in der ursprünglichen Probe vorhandenen phosphorylierten Proteins (Abbildung 3). Die Phospho-spezifische ELISA-Technik verleiht mehrere Vorteile gegenüber dem traditionelleren Immunoblotting bei der Messung der Proteinphosphorylierung. Erstens sind die Ergebnisse leicht quantifizierbar, indem ein kalibrierter Standard verwendet wird. Zweitens ist eine hohe Spezifität aufgrund der Verwendung von zwei für das Zielprotein spezifischen Antikörpern möglich, die gemeinsam im Sandwich-Format verwendet werden. Drittens ermöglicht die durch ELISAs oft erzielte höhere Empfindlichkeit kleinere Probenvolumina und den Nachweis von Proteinen mit geringer Häufigkeit.
Rabbit Anti Phosphothreonine Polyclonal Antibody,Biotin |
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| DPBT-68215RP | Creative Diagnostics | 50 µg | 1057.2 EUR |
Rabbit Polyclonal antibody Anti-CRBN |
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| Anti-CRBN | ImmunoStep | 50 µg | 418.8 EUR |
Rabbit Anti Phosphothreonine Polyclonal Antibody |
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| DPBT-68217RP | Creative Diagnostics | 50 µg | 852 EUR |
Rabbit Anti Phosphothreonine Polyclonal Antibody,HRP |
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| DPBT-68216RP | Creative Diagnostics | 50 µg | 982.8 EUR |
Phosphothreonine antibody (biotin) |
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| 60R-PR002bt | Fitzgerald | 100 ug | 1008 EUR |
Phosphothreonine Antibody (Biotin) |
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| abx448368-400ul | Abbexa | 400 ul | 710.4 EUR |
Anti-Phosphothreonine, Rabbit Monoclonal Antibody |
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| A1810-50 | Biovision | each | 444 EUR |
Hemoglobin (HB) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAB409Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Albumin (ALB) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAB028Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Haptoglobin (Hpt) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA817Rb52-Biotin | Cloud-Clone |
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Arginase (ARG) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAB120Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Interleukin 15 (IL15) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA061Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Interleukin 18 (IL18) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA064Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Immunoglobulin G1 (IgG1) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA074Rb56-Biotin | Cloud-Clone |
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Interleukin 4 (IL4) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA077Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Interleukin 6 (IL6) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA079Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Apolipoprotein C1 (APOC1) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA252Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Galectin 3 (GAL3) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA303Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Apolipoprotein A1 (APOA1) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA519Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Tissue Factor (TF) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA524Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Immunoglobulin G (IgG) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA544Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Angiopoietin 2 (ANGPT2) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA009Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Interferon Alpha (IFNa) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA033Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Interferon Gamma (IFNg) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA049Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Interleukin 10 (IL10) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA056Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Metallothionein 1 (MT1) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAB119Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Anti-human CD14 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC00137-Biotin | BosterBio | 100µg | 279.6 EUR |
Anti-human CD11b Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC00144-Biotin | BosterBio | 100µg | 182.4 EUR |
Anti-human CD19 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC00154-Biotin | BosterBio | 100µg | 182.4 EUR |
Anti-human CD38 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC00193-Biotin | BosterBio | 100µg | 182.4 EUR |
Anti-human CD25 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC00214-Biotin | BosterBio | 100µg | 279.6 EUR |
Anti-human CD4 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC00344-Biotin | BosterBio | 100µg | 182.4 EUR |
Anti-human CD5 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC00480-Biotin | BosterBio | 100µg | 279.6 EUR |
Anti-human CD45 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC00555-Biotin | BosterBio | 100µg | 182.4 EUR |
Anti-human CD2 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC00570-Biotin | BosterBio | 100µg | 279.6 EUR |
Anti-human CD71 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC00591-Biotin | BosterBio | 100µg | 294 EUR |
Anti-human CD62L Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC00652-Biotin | BosterBio | 100µg | 279.6 EUR |
Anti-human CD59 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC00914-Biotin | BosterBio | 100µg | 318 EUR |
Anti-human CD117 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC01335-Biotin | BosterBio | 100μg | 268.8 EUR |
Anti-human CD32 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC01450-Biotin | BosterBio | 100µg | 279.6 EUR |
Anti-human CD90 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC01818-Biotin | BosterBio | 100µg | 321.6 EUR |
Anti-human CD7 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC01974-Biotin | BosterBio | 100µg | 279.6 EUR |
Anti-human CD235a Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC02184-Biotin | BosterBio | 100µg | 294 EUR |
Anti-human CD8 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC02236-Biotin | BosterBio | 100µg | 182.4 EUR |
Anti-Human VEGI Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC02402-Biotin | BosterBio | Various Sizes | 596.4 EUR |
Anti-human CD3 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC02675-Biotin | BosterBio | 100µg | 182.4 EUR |
Anti-human CD20 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC03780-Biotin | BosterBio | 100µg | 279.6 EUR |
Anti-human CD10 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC04065-Biotin | BosterBio | 100µg | 226.8 EUR |
Anti-human CD57 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC09548-Biotin | BosterBio | 100µg | 294 EUR |
Monoclonal Anti-Phosphothreonine (PY20) IgG-Biotin conjugate |
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| PTHR12-BTN | Alpha Diagnostics | 100 ul | 489.6 EUR |
Interleukin 1 Alpha (IL1a) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA071Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA099Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Matrix Metalloproteinase 12 (MMP12) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA402Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Interleukin 1 Beta (IL1b) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA563Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Ciliary Neurotrophic Factor (CNTF) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA021Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Coagulation Factor IX (F9) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA840Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Alpha-2-Macroglobulin (a2M) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAB017Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Transglutaminase 1, Keratinocyte (TGM1) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAB773Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Complement Component 9 (C9) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAB823Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Carbonic Anhydrase II (CA2) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA782Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Anti-human HLA-DR Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC00568-Biotin | BosterBio | 100µg | 279.6 EUR |
Anti-human CD55/Daf Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC00910-Biotin | BosterBio | 100µg | 279.6 EUR |
Phosphothreonine antibody |
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| 70R-PR006 | Fitzgerald | 100 ug | 159.6 EUR |
Phosphothreonine antibody |
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| 20C-CR1334RP | Fitzgerald | 100 ug | 159.6 EUR |
Phosphothreonine Antibody |
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| abx448440-400ul | Abbexa | 400 ul | 644.4 EUR |
Phosphothreonine Antibody |
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| R20193-100UG | NSJ Bioreagents | 100ug | 459 EUR |
Interleukin 1 Receptor Antagonist (IL1RA) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA223Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Connective Tissue Growth Factor (CTGF) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA010Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA011Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA013Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA014Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA133Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Alpha-1-Acid Glycoprotein (a1AGP) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA816Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Anti-human CD33/Siglec 3 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC01508-Biotin | BosterBio | 100µg | 280.8 EUR |
Anti-human CD22/Siglec 2 Monoclonal Antibody Biotin Conjugated, Flow Validated |
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| FC01572-Biotin | BosterBio | 100µg | 279.6 EUR |
Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule (ALCAM) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA002Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Transforming Growth Factor Beta 1 (TGFb1) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA124Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Fibroblast Growth Factor 2, Basic (FGF2) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA551Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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S100 Calcium Binding Protein B (S100B) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA567Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Insulin Like Growth Factor 1 (IGF1) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA050Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA143Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Protein Kinase C Beta 1 (PKCb1) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAB045Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Collagen Type VIII Alpha 1 (COL8a1) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAC146Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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S100 Calcium Binding Protein A8 (S100A8) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAB792Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Polyclonal Rabbit Anti-Biotin |
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| C020116-10mg | Unibiotest | 10mg | 3669.6 EUR |
Polyclonal Rabbit Anti-Biotin |
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| C020116-1mg | Unibiotest | 1mg | 627.6 EUR |
Polyclonal Goat anti-GST α-form |
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| GST-ANTI-1 | Detroit R&D | 50 uL | 336 EUR |
Polyclonal Goat anti-GST μ-form |
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| GST-ANTI-2 | Detroit R&D | 50 uL | 336 EUR |
Polyclonal Goat anti-GST p-form |
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| GST-ANTI-3 | Detroit R&D | 50 uL | 336 EUR |
Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial (NOS3) Polyclonal Antibody (Human, Rat, Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAA868Ra01-Biotin | Cloud-Clone |
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Major Histocompatibility Complex Class II DR Alpha (MHCDRa) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAC166Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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ATPase, Na+/K+ Transporting Alpha 1 Polypeptide (ATP1a1) Polyclonal Antibody (Rabbit), Biotinylated |
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| 4-PAG369Rb51-Biotin | Cloud-Clone |
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Rabbit Anti-Bacillus Polyclonal antibody [Biotin] |
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| CABT-RM185 | Creative Diagnostics | 1 ml | 850.8 EUR |
Rabbit Anti Phosphoserine Polyclonal Antibody,Biotin |
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| DPBT-68212RP | Creative Diagnostics | 50 µg | 1057.2 EUR |
Phosphothreonine-Pro antibody |
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| 20R-PR017 | Fitzgerald | 100 ug | 159.6 EUR |
Phosphothreonine Antibody (APC) |
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| abx448360-400ul | Abbexa | 400 ul | 710.4 EUR |
Phosphothreonine Antibody (FITC) |
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| abx448374-400ul | Abbexa | 400 ul | 693.6 EUR |
Phosphothreonine Antibody (PerCP) |
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| abx448394-400ul | Abbexa | 400 ul | 710.4 EUR |
Phosphothreonine Antibody (RPE) |
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| abx448402-400ul | Abbexa | 400 ul | 710.4 EUR |
Phosphothreonine Antibody (Streptavidin) |
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| abx448410-400ul | Abbexa | 400 ul | 710.4 EUR |
Schließlich ermöglicht das Mikroplatten-basierte Format einen viel höheren Durchsatz als herkömmliches Western Blotting (View Surveyor IC ELISA Kits). ELISAs liefern im Allgemeinen eine indirekte Messung der Kinaseaktivität. Variationen der oben beschriebenen Technik verwenden jedoch einen immobilisierten Capture-Antikörper, ein Substrat und ein Phospho-Substrat-Nachweisverfahren für direktere Messungen der Kinase-Aktivität.