• August 16, 2022

HEV-Seroprävalenz bei Blutspendern in der Türkei mit zwei kommerziellen Anti-HEV-ELISA-Kits.

Frühere Studien zur Seroprävalenz des Hepatitis-E-Virus (HEV) in der Türkei haben eine hohe Variabilität gezeigt, was zu widersprüchlichen Ergebnissen führte. Unser Ziel war es, die HEV-Seroprävalenz unter Blutspendern in der Türkei mit Hilfe der Enzymimmunoassay (ELISA)-Kits Wantai (Peking, China) und Dia.Pro (Mailand, Italien) neu zu bewerten, ihre Leistung zu vergleichen und das Vorhandensein von HEV-RNA bei Blutspendern zu untersuchen. Die gesamten Anti-HEV-Antikörper im Serum wurden bei insgesamt 2011 freiwilligen Blutspendern aus verschiedenen Regionen der Türkei (807 aus Ankara, 243 aus Kayseri, 284 aus İzmir, 200 aus Malatya, 200 aus Kahramanmaraş und 277 aus Van) bestimmt.

HEV-RNA wurde mittels Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion in insgesamt 272 Anti-HEV-seropositiven Proben nachgewiesen. Die landesweite HEV-Seroprävalenz wurde mit 11,5 % (Dia.Pro) und 12,2 % (Wantai) berechnet, mit Seropositivitätsraten von 12,0 % bis 12,5 % in Ankara, 7,4 % bis 8,2 % in Kayseri, 14,5 % bis 15,5 % in Malatya, 8,1 % bis 8,8 % in İzmir, 15,0 % bis 16,0 % in Kahramanmaraş und 12,6 % bis 13,4 % in Van durch Dia.Pro bzw. Wantai-Kits. Die niedrigsten nachweisbaren Ab-Konzentrationen betrugen 0,16 und 0,14 Einheiten/ml WHO für den Dia.Pro- bzw. den Wantai-Test, was keinen signifikanten Unterschied zwischen den Tests erkennen lässt. HEV-RNA wurde in keiner der seropositiven Anti-HEV-Proben nachgewiesen.

Im Vergleich zu früheren Studien zeigte sich, dass HEV in der Türkei insgesamt eine höhere Seroprävalenz aufweist. Trotz ihrer Einschränkungen stellt die aktuelle Studie die bisher umfassendste HEV-Seroprävalenzstudie in der Türkei dar, die mit zwei verschiedenen kommerziellen ELISA-Assays mit hoher Sensitivität durchgeführt wurde. Weitere Untersuchungen sind erforderlich, um die HEV-Genotypen in der Türkei zu bestimmen.

Vergleich zweier kommerzieller ELISA-Kits für den Nachweis von Anti-Dengue-IgM für die routinemäßige Dengue-Diagnose in Laos.

Die Endemizität der Dengue-Virusinfektion (DENV) ist nach wie vor ein großes gentaur.de   Problem für die öffentliche Gesundheit in der Demokratischen Volksrepublik Laos. In dieser Studie verglichen wir zwei kommerzielle Anti-Dengue-IgM-ELISA-Kits, den Panbio® Dengue IgM Capture ELISA (Panbio Kit, Alere, Waltham, MA, USA) und den DEN DetectTM MAC-ELISA (InBios Kit, InBios International, Inc., Seattle, WA, USA), im Rahmen der Diagnose von Patienten, die mit einer klinischen Dengue-Infektion ins Krankenhaus eingeliefert wurden. Es wurden zwei Panels mit gepaarten Blutproben getestet. Panel A bestand aus 54 Dengue-Patienten, bei denen Dengue bestätigt wurde (durch DENV-RT-PCR in Echtzeit), und 11 Nicht-Dengue-Patienten (andere Infektionen, die durch entsprechende PCR-Ergebnisse bestätigt wurden).

Panel B umfasste 74 Patienten, die nach dem Zufallsprinzip aus einer Reihe von Patienten ausgewählt wurden, die 2008 in das Mahosot-Krankenhaus eingeliefert wurden und bei denen der Verdacht auf Dengue-Fieber gemäß den WHO-Kriterien bestand. Die Ergebnisse von Panel A zeigten bei der Untersuchung von Aufnahmeseren eine signifikant bessere Sensitivität für den Panbio-Kit (64,8 %; 95 %CI: 50,6-77,3 %) als für den InBios-Kit (18,5 %; 95 %CI: 9,3-31,4 %). Die Sensitivität wurde für beide Kits erhöht, wenn die Ergebnisse von Aufnahme- und Rekonvaleszentenseren kombiniert wurden. Mit Panel B wurden übereinstimmende Ergebnisse erzielt, wobei beide Kits bei der Untersuchung einzelner Aufnahmeseren eine gute Übereinstimmung (κ = 0,29) und bei der Kombination der Ergebnisse von Aufnahme- und Rekonvaleszentenseren eine mäßige Übereinstimmung (κ = 0,5) zeigten.

Bestimmung von Prolaktin in Hundespeichel: Ist es möglich, einen kommerziellen ELISA-Kit zu verwenden?

Prolaktin ist bei verschiedenen Tierarten ein bemerkenswerter Index für akute und chronische Stressreaktionen. Aufgrund der geringeren Invasivität bei der Entnahme wird die Verwendung anderer biologischer Matrices als Blut bei der Untersuchung von Hormonen immer interessanter. Ziel dieser Studie war es, die Möglichkeit der Verwendung eines kommerziellen ELISA-Kits (enzyme-linked immunosorbent assay) zur Messung von Hundeprolaktin in Blut für die Quantifizierung von Hundeprolaktin in Speichel zu untersuchen. Studie 1 bestand aus einem Validierungsprotokoll, bei dem Speichelproben von laktierenden und nicht laktierenden Hunden verwendet wurden.

Studie 2 wurde durchgeführt, um eine mögliche Korrelation zwischen der Prolaktinkonzentration in Speichel und Plasma bei geschützten Hunden unter Verwendung desselben Kits zu untersuchen. Die Prolaktinwerte wurden nur dann zuverlässig abgelesen, wenn sie aus Blutproben und nicht aus Speichel stammten, wobei sie in den meisten Fällen eher niedrig waren. Studie 1 zeigte, dass Speichel eine Matrixwirkung hat.

In Studie 2 waren die Prolaktinwerte im Speichel niedrig und in 42,9 % der Fälle nicht ablesbar. Es wurde keine Korrelation zwischen den Prolaktinwerten in Plasma und Speichel festgestellt (ρ=0,482; p=0,274). Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass die Bestimmung von Prolaktin im Hundespeichel mittels eines ELISA-Kits, der für die Messung von Prolaktin im Hundeblut entwickelt wurde, unzuverlässig ist.

Bestimmung der Antikörperinduktion durch den Impfstoff gegen das hochpathogene porcine reproduktive und respiratorische Syndrom (HP-PRRSV): Ein Vergleich von zwei ELISA-Kits.

Zwei handelsübliche ELISA-Kits für Antikörper gegen das porcine reproduktive und respiratorische Syndromvirus (PRRSV) (IDEXX und LSI) werden derzeit in großem Umfang verwendet. Um festzustellen, welches Kit für die Bewertung der Wirksamkeit des HP-PRRSV-Impfstoffs besser geeignet ist, wurden mit den beiden Kits 546 Serumproben untersucht. Die Übereinstimmung zwischen den Ergebnissen war mit einer Kappa-Statistik von 0,681 und einem linearen Korrelationskoeffizienten von 0,665 unbefriedigend. Bei der Untersuchung von Proben aus experimentell geimpften und PRRSV-negativen Beständen identifizierte der IDEXX-ELISA die Antikörper-positive Konversion früher und zeigte eine höhere Spezifität als der LSI-ELISA. Das serologische Profil, das durch Neutralisationstests erhalten wurde, war in der späten Immunisierungsphase näher an dem durch IDEXX-ELISA als durch LSI-ELISA erhaltenen Profil. Die Ergebnisse zeigen, dass der IDEXX-ELISA für die Bewertung der Antikörperreaktion auf den HP-PRRSV-Impfstoff und für die Festlegung von Impfstrategien besser geeignet ist.

Validierung des Neogen ELISA Benzodiazepin-Kits mit Clonazepam als Zielmolekül für Blut und Urin.

Diese Studie demonstriert die Validierung einer semi-quantitativen Methode für das schnelle Screening von Vollblut- und Urinproben unter Verwendung von Clonazepam als Zielmolekül für den Neogen® Benzodiazepin-Kit. Die Entscheidungspunkte wurden bei 10,0 ng/ml für Vollblut und 25,0 ng/ml für Urin validiert. Das Validierungsdesign basierte auf den Standardpraktiken der Scientific Working Group for Forensic Toxicology (SWGTOX) für die Methodenvalidierung und umfasste die Bewertung der Sensitivität, Präzision, Spezifität, Verschleppung, des Hook-Effekts, der Drift, der Robustheit/Robustheit sowie eine Fallprobenbewertung.

Die experimentelle Nachweisgrenze für Clonazepam wurde auf mindestens 5,0 ng/ml im Vollblut und mindestens 10,0 ng/ml im Urin festgelegt. Eine ausgezeichnete Präzision wurde nachgewiesen, als der Assay anhand des Mittelwerts von drei Wiederholungen aus fünf separaten Läufen (n = 15) am Entscheidungspunkt und bei Konzentrationen von ±50 % und +100 % des Entscheidungspunkts bewertet wurde. Obwohl die Methode optimiert wurde und auf jeder Stufe eine außergewöhnliche Präzision nachgewiesen wurde, wurden die aktuellen SWGTOX-Validierungsanforderungen für einen gültigen Entscheidungspunkt nicht erfüllt.

Allerdings erfüllten sowohl die Blut- als auch die Urinmatrix die vorgeschlagene Revision der SWGTOX-Anforderungen für die Bestimmung eines gültigen Entscheidungspunktes, die vom American Academy of Forensic Sciences Standards Board herausgegeben wurde, und der Assay war zuverlässig in der Lage, Benzodiazepine ohne Interferenzen durch Matrixkomponenten oder andere Verbindungen, die routinemäßig in authentischen Fallproben nachgewiesen werden, nachzuweisen. Die Ergebnisse der Fallproben waren vergleichbar mit denen, die bei einem ersten Screening der Proben mit Oxazepam als Zielmolekül erzielt wurden.

Der Neogen Benzodiazepin-Kit mit Clonazepam als Zielmolekül wies eine Kreuzreaktivität für 29 verschiedene Benzodiazepine auf und zeigte sowohl im Vollblut als auch im Urin eine ausgezeichnete Präzision und Sensitivität, was ihn zu einer effizienten und zuverlässigen Methode für das Screening auf Benzodiazepine macht, auch wenn die Validierung nicht die aktuellen SWGTOX-Anforderungen für einen gültigen Entscheidungspunkt erfüllte.

 

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