Risiko der durch Transfusionen übertragenen Malaria: Bewertung kommerzieller ELISA-Kits für den Nachweis von Anti-Plasmodium-Antikörpern bei Blutspenderkandidaten
Transfusion of Plasmodium-infected blood poses a risk for transmission of malaria, a rare but serious event. Several malaria-free countries have developed a strategy for screening potential blood donors that includes a questionnaire to identify those at risk and laboratory testing of blood samples, often on a serological basis, with those with a positive result being temporarily excluded from donating will. Since there is no gold standard for malaria serology, the aim of this work was to evaluate five commercial ELISA kits and their accuracy (sensitivity and specificity) compared to the immunofluorescent antibody test (IFAT) as well as their agreement (concordance of the results).
Serum samples were tested from malaria patients or persons with a history of malaria (N = 64), from malaria-naïve patients with other parasitic infections (N = 15), from malaria-naïve blood donors (N = 8) and from malaria-exposed blood donor candidates (N = 36 ) The specificity of all ELISA kits was 100%, while the sensitivity compared to the IFAT for samples from malaria patients was between 53 and 64%. When testing samples from candidate blood donors, the ELISA kits showed very variable agreement (42-94%), raising the possibility that the same individual could be excluded or included in the donation depending on the test used by the transfusion center. gentaur.de There is a need to develop more sensitive serological tests. In addition, the introduction of a uniform serological test at the national level, as well as the development of screening algorithms based on several laboratory tests, including molecular tests, is recommended.
Investigation of deoxynivalenol contamination of agricultural products in the Chinese market using an ELISA kit.
A total of 328 samples of agricultural products suspected of being contaminated were analyzed for deoxynivalenol (DON) contamination using an ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay) kit from flour manufacturers, feed manufacturers and livestock farms across China. An ELISA kit for DON was developed with a limit of detection (LOD) of 4.9 ng mL-1 in working buffer and a LOD of 200 ng g-1 in authentic samples. The DON contamination detection rate was 88.7%, concentrations ranged from 200.9 to 6480.6 ng g-1, and the highest DON contamination was found in solvent distilled grain with an average of 3204.5 ng g-1 .
Wheat bran and wheat were found to be the most commonly contaminated samples, and the cornmeal samples had the lowest average DON levels. This ELISA kit is a powerful alternative method for the rapid, sensitive, specific, accurate, and high-throughput determination of DON and can meet regulatory limits. This investigation indicates that DON contamination in the Chinese market is serious and the risk of contamination deserves attention. To ensure food safety and human health, basic preventive measures should be taken.
Comparison of three commercial IgG and IgM ELISA kits for the detection of antibodies to tick-borne encephalitis virus.
Tick-borne encephalitis (TBE) is endemic in many parts of Europe and Asia. The diagnosis of this disease is essentially based on the detection of specific antibodies. For reasons of simplicity, the possibility of automation and the rapid availability of test results, enzyme immunoassays (ELISA) are the method of choice for the serological diagnosis of TBE. Three commercially available anti-TBE virus IgG and IgM ELISAs were evaluated here using 251 serum samples: the SERION ELISA classic TBE virus/TBE virus IgG and IgM kit (Virion\Serion), the RIDASCREEN FSME/TBE IgG and IgM kit (R-Biopharm) and the anti-FSME/TBE virus ELISA “Vienna” IgG/anti-FSME/TBE virus ELISA IgM kit (Euroimmun). Overall, 37/251 (14, 7%) of the examined samples found deviating test results for IgG and/or IgM; the differences were statistically significant.
Für eine Teilmenge der Proben wurden Referenzwerte durch den Serumneutralisationstest (SNT, n = 25) oder Ergebnisse von Ringversuchsveranstaltern (n = 2) ermittelt. In Bezug auf diese Werte wurden falsch-positive Ergebnisse hauptsächlich für Euroimmun Vienna IgG und RIDASCREEN IgG beobachtet, während falsch-negative Ergebnisse hauptsächlich für Virion\Serion IgG und RIDASCREEN IgM Kits beobachtet wurden. In der Routinediagnostik sind Spezifitätsprobleme von großer Bedeutung und können durch die Analyse der entsprechenden Proben mit SNT behoben werden.
Entwicklung eines Diagnosekits für das Enzym Oxalyl-CoA-Decarboxylase mittels ELISA-Methode.
Harnsteine sind die am dritthäufigsten gemeldete Erkrankung des Harntrakts. Nierensteine sind eine der häufigsten Arten von Harnsteinen, von denen die meisten (70-80 %) aus Kalziumoxalat bestehen. Oxalsäure ist eine stark oxidierte organische Verbindung, die in der Nahrung vorkommt und von der Darmmikroflora produziert wird. Oxalyl-CoA-Decarboxylase ist ein Schlüsselenzym und spielt eine wichtige Rolle beim Oxalatabbau. In dieser Studie wurde das Oxalyl-CoA-Decarboxylase-Gen, das einen -Histidin-Tag enthält, in pET 28a (+) kloniert und in Escherichia coli BL21 (DE3) exprimiert. Das gereinigte Oxalyl-CoA-Decarboxylase-Protein wurde zur Immunisierung in Kaninchen injiziert. Der Antikörper gegen das Oxalyl-CoA-Decarboxylase-Protein wurde in der ELISA-Analyse verwendet. Dieses ELISA-System wurde schließlich bei Patienten mit Calciumoxalat-Nierensteinen eingesetzt. Die ELISA-Analyse der Serumproben von Patienten mit weißen Kalziumoxalat-Nierensteinen ergab, dass bei 88,8 % der Patienten Antikörper gegen Oxalyl-CoA-Decarboxylase fehlten. Diese Studie deutet darauf hin, dass Antikörper gegen Oxalyl-Co-Decarboxylase-Proteine bei der Erkennung von Harnwegssteinen nützlich sind und dass sie zur Messung von Oxalyl-CoA-Decarboxylase-Enzymen mit einer einfachen Methode verwendet werden können.
Vergleichende Bewertung von zwei ELISA-Kits zum Nachweis von Antikörpern gegen ein Nichtstrukturprotein des Maul- und Klauenseuche-Virus unter Verwendung von Serumproben, die von natürlich und experimentell infizierten Kühen stammen.
Wenn in einem Land die Maul- und Klauenseuche (MKS) auftritt und eine “Impfung zum Leben” eingeführt wird, muss das Land eine serologische Überwachung eines Nichtstrukturproteins (NSP) des MKS-Virus durchführen. Das NCPanaftosa-Kit ist das einzige Kit zum Nachweis von Antikörpern gegen NSP, das von der Weltorganisation für Tiergesundheit offiziell als Referenzregent anerkannt ist; es wird jedoch nur in südamerikanischen Ländern verwendet. In dieser Studie wurden die Spezifität und Empfindlichkeit des NCPanaftosa-Kits mit denen des PrioCHECK-Kits eines internationalen Unternehmens verglichen. Die Ergebnisse dieser Studie deuten darauf hin, dass der PrioCHECK-Kit beim Nachweis von NSP-Antikörpern in der Rinderpopulation eine ähnliche Leistung wie der NCPanaftosa-Kit erbringt.
Vergleich des Nutzens der rekombinanten B8/2-Untereinheit des Antigens B, des nativen Antigens und eines kommerziellen ELISA-Kits bei der Diagnose der zystischen Echinokokkose des Menschen
Zystische Echinokokkose (CE) ist eine helminthische Erkrankung, die durch die Larvenform von Echinococcus granulosus verursacht wird. In der vorliegenden Studie wurde die B8/2-Untereinheit des Antigens B (AgB) von E. granulosus in einem E. coli-Wirt exprimiert und dann in einem diagnostischen ELISA eingesetzt.
Die DNA-Sequenz der AgB8/2-Untereinheit von E. granulosus wurde aus der GenBank extrahiert und kodon-optimiert. Die Zielsequenz wurde in einen Expressionsvektor (pGEX-4T-1) kloniert. Das produzierte Antigen wurde in einem ELISA-System verwendet, und seine Leistungsfähigkeit bei der Diagnose menschlicher Hydatidenzysten wurde anhand von Seren von CE- und Nicht-CE-Patienten sowie von Seren gesunder Personen bewertet. Darüber hinaus wurde der diagnostische Wert des rekombinanten Proteins mit nativem AgB sowie mit einem kommerziellen Kit verglichen.
Antikörper gegen Hydatidenzysten wurden bei 27 von 30 Patienten nachgewiesen, was einer Sensitivität von 90 % (95 % CI: 73-98 %) entspricht. Eine Kreuzreaktion mit Seren von Nicht-CE-Patienten wurde in zwei Fällen beobachtet, was zu einer Spezifität von 93,5 % (95 % CI: 82-98 %) für den Test führte. Für die native Form des Antigens wurde eine Sensitivität von 87 % und eine Spezifität von 90 % festgestellt, während der kommerzielle ELISA-Kit eine Sensitivität von 97 % und eine Spezifität von 95 % aufwies.
Unsere Daten zeigen, dass rEgAgB8/2 eine geeignete Antigenquelle für die serologische Diagnose der menschlichen Hydatidenzyste ist. Die Koexpression von rEgAgB/2 zusammen mit anderen Untereinheiten von AgB kann die Leistungsfähigkeit dieser Antigene für die Serodiagnose menschlicher CE verbessern.
Vergleich von sechs kommerziellen IgM- und IgG-ELISA-Kits für Zeckenenzephalitis und molekulare Charakterisierung ihres antigenen Designs.
Die Diagnose des Zeckenenzephalitis-Virus (FSMEV) beruht hauptsächlich auf dem Nachweis virusspezifischer Antikörper im Serum. Es sind mehrere kommerzielle Assays erhältlich, aber die veröffentlichten Daten über ihre Leistungsfähigkeit sind unklar. Wir haben sechs kommerzielle IgM- und sechs IgG-Immunoassay-Kits (ELISA-1 bis ELISA-6) anhand von 94 Proben untersucht, darunter vorcharakterisierte FSME-positive Proben (n=50) und -negative Proben (n=44). Die sechs Hersteller zeigten eine zufriedenstellende Sensitivität und Spezifität sowie eine hohe Gesamtübereinstimmung sowohl für IgM als auch für IgG.Three manufacturers showed better reproducibility and were the most sensitive (100%) and most specific (95.5-98.1%) for both IgM and IgG. Two of them also agreed with the clinical interpretation in more than 90% of the cases. All assays use inactivated virus as antigen, with strains sharing approximately 94% homology at the amino acid level. The antigen format of the assays was discussed to further improve this TBE diagnostic tool.