Kit zur direkten Maus-Genotypisierung
Abstrakt
Der direkte PCR-Ansatz erleichtert die PCR-Amplifikation direkt aus kleinen Mengen ungereinigter Proben und wird hier für mehrere pflanzliche und tierische Gewebe demonstriert. Die direkte PCR basiert auf speziell entwickelten Phusion- und Phire-DNA-Polymerasen von Thermo Scientific, die eine doppelsträngige DNA-Bindungsdomäne enthalten, die ihnen einzigartige Eigenschaften wie eine hohe Toleranz gegenüber Inhibitoren verleiht.
Der PCR-basierte Ziel-DNA-Nachweis hat zahlreiche Anwendungen in der Pflanzenforschung, einschließlich der Analyse von Pflanzengenotypen und der Verifizierung von Transgenen.
Die PCR aus Pflanzengewebe beinhaltet traditionell einen anfänglichen DNA-Isolierungsschritt, der teure oder toxische Reagenzien erfordern kann. Der Prozess ist zeitaufwändig und erhöht das Risiko einer Kreuzkontamination1, 2.
- Umgekehrt kann die Ziel-DNA mit dem Thermo Scientific Phire Plant Direct PCR Kit ohne vorherige DNA-Extraktion leicht nachgewiesen werden. In dem hier gezeigten Modell wird ein Beispiel für abgeleitete gespaltene amplifizierte polymorphe Sequenzanalysen (dCAPS)3,4 direkt an Arabidopsis-Pflanzenblättern durchgeführt. dCAPS-Genotypisierungsassays können verwendet werden, um Einzelnukleotid-Polymorphismen (SNPs) durch SNP-Allel-spezifische Restriktionsendonuklease-Verdauung zu identifizieren3.
- Einige Pflanzenproben sind bei der Verwendung von direkten PCR-Methoden tendenziell schwieriger, da sie Komponenten enthalten, die die PCR stören, wie z. B. phenolische Verbindungen.
- In diesen Fällen ist traditionell ein zusätzlicher Schritt zur Entfernung der Verbindungen erforderlich2,5. Hier wird dieses Problem überwunden, indem ein schnelles und einfaches Verdünnungsprotokoll gefolgt von einer direkten PCR-Amplifikation verwendet wird. Fünfzehn Jahre alte Eichenblätter werden als Modell für herausfordernde Pflanzen verwendet, da das Exemplar hohe Mengen an phenolischen Verbindungen einschließlich Tanninen enthält.
- Der Gentransfer in Mäuse wird allgemein verwendet, um die Rolle von Genen in der Entwicklung, Physiologie und menschlichen Krankheiten zu untersuchen. Die Verwendung dieser Tiere erfordert ein Screening auf das Vorhandensein des Transgens, üblicherweise mit PCR.
- Traditionell beinhaltet dies einen zeitaufwändigen DNA-Isolierungsschritt, während dessen DNA für die PCR-Analyse aus Ohr-, Schwanz- oder Zehengewebe gereinigt wird6,7. Mit dem Thermo Scientific Phire Animal Tissue Direct PCR Kit können transgene Mäuse jedoch ohne vorherige DNA-Reinigung genotypisiert werden. In diesem Protokoll erfolgt die transgene Maus-Genotypisierung direkt aus Mausohrgeweben, wie hier für ein herausforderndes Beispiel gezeigt, bei dem nur ein Primersatz zur Amplifikation von zwei Fragmenten mit stark unterschiedlicher Größe verwendet wird.
Protokoll
1. Genotypisierung von Arabidopsis-Pflanzenindividuen mit direktem Protokoll
1Um mit dem dCAPS-Genotypisierungsassay direkt auf dem Blatt der Arabidopsis-Pflanze zu beginnen, formulieren Sie zuerst 20 oder 50 μl PCR-Reaktionen mit dem Phire Plant Direct PCR Kit .
2Schneiden Sie als Nächstes mit dem Harris Uni-Core und der Harris-Schneidmatte einen 0,50-mm-Stanzer aus einem Arabidopsis-Pflanzenblatt. Halten Sie den Puncher fest, drücken Sie die Schneide in das Gewebe und drehen Sie den Puncher hin und her.
3.Drücken Sie den Kolben, um die Lochscheibe in eine PCR-Reaktionsmischung auszuwerfen. Stellen Sie sicher, dass die Probe in die PCR-Lösung tropft und nicht an den Röhrchenwänden haftet.
4. Reinigen Sie die Schneidkante des Lochers zwischen jeder Probe, um eine Kreuzkontamination zu vermeiden, indem Sie ihn in eine 2%ige NaClO-Lösung eintauchen. Drücken Sie den Kolben ein paar Mal auf und ab und wischen Sie die Schneide mit einem sauberen Papiertuch ab. Die Schneidematte sollte auch zwischen den Proben gespült werden.
5. Verwenden Sie als Nächstes einen Thermo Scientific Piko 24-Well-Thermocycler und eine Thermo Scientific Piko PCR-Platte, um die PCR-Reaktionen unter den in Tabelle 2 beschriebenen Zyklusbedingungen durchzuführen. Die PCR-Reaktionen können auch in herkömmlichen PCR-Thermocyclern durchgeführt werden.
6. Zentrieren Sie nach der PCR das Pflanzenmaterial. Übertragen Sie 5 ul des Überstands in ein neues Mikrozentrifugenröhrchen. Fügen Sie 4 ul Wasser und 1 ul Restriktionsenzym SspI hinzu. Vorsichtig mischen und kurz herunterzentrifugieren, um den Inhalt am Boden des Röhrchens zu sammeln. Inkubieren Sie die Reaktionsmischung für eine Stunde bei 37 °C. Inaktivieren Sie das Restriktionsenzym durch Inkubation bei 65 °C für 20 min.
7. Bei der Amplifikation von DNA direkt aus Pflanzengewebe enthalten die PCR-Produkte Pflanzen- und PCR-abgeleitete Komponenten, die das Restriktionsverdauungsenzym stören können. Daher kann es erforderlich sein, das PCR-Produkt vor dem anschließenden Verdau entweder zu verdünnen (z. B. 1:2 oder 1:3 in Wasser) oder zu reinigen, z. B. mit einem geeigneten kommerziellen Kit wie dem Thermo Scientific GeneJET PCR Purification Kit.
8. Analysieren Sie nach dem Restriktionsenzymverdau die resultierenden Fragmente auf einem Agarosegel. Fügen Sie der Reaktion 2,5 μl 5x Ladepuffer hinzu und führen Sie eine Agarose-Gelelektrophorese mit 10 μl der resultierenden Mischung durch.
2. Amplifikation spezifischer DNA-Fragmente aus 15 Jahre alten Eichenblättern unter Verwendung des Verdünnungsprotokolls
1.Schneiden Sie zunächst einen 2-mm-Stanzer aus Eichenblatt.
2. Legen Sie die Probe in 20 μl Verdünnungspuffer, der mit dem Phire Plant Direct PCR Kit geliefert wird. Reinigen Sie die Schnittkante des Lochers und der Schneidematte wie zuvor.
3. Die Blattprobe mit einer 100-μl-Pipettenspitze zerdrücken, indem sie kurz gegen die Röhrchenwand gedrückt wird. Je nach Pflanzenmaterial funktioniert das Verdünnungsprotokoll manchmal besser, ohne die Probe zu zerkleinern.
4.Zentrifugieren Sie die Proben kurz in einer Mikrozentrifuge, bis sich die Reaktionen am Boden der Röhrchen befinden.
5. Der Überstand kann direkt in der PCR verwendet oder je nach Probentyp 1:10 oder 1:100 in sterilem Wasser verdünnt werden. 6.Verwenden Sie 0,5 μl bis 1 μl des Überstands oder der Verdünnung als Matrize für eine 20 μl-PCR-Reaktion. Bereiten Sie die Reaktion wie in Tabelle 1 beschrieben vor.
7.Sobald die Reaktionen vorbereitet sind, verwenden Sie einen Thermo Scientific Piko 24-Well-Thermocycler und eine Thermo Scientific Piko PCR-Platte, um die PCR-Reaktionen unter den in Tabelle 2 beschriebenen Zyklusbedingungen durchzuführen. Die PCR-Reaktionen können auch in herkömmlichen PCR-Thermocyclern durchgeführt werden .
8. Geben Sie nach der PCR 5 μl 5-fachen Ladepuffer zur Reaktion und führen Sie mit 15 μl der resultierenden Mischung eine Agarose-Gelelektrophorese durch.
3. Genotypisierung von transgenen Mäusen unter Verwendung des Verdünnungsprotokolls
1.Beginnen Sie das Verdünnungsprotokoll bei transgenen Mäusen, indem Sie eine 2-mm-Stanze des Mausohrs in 20 μl Verdünnungspuffer mit 0,5 μl DNARelease-Additiv aus dem Phire Animal Tissue Direct PCR Kit geben.
2.Inkubieren Sie die Proben 2 min bei Raumtemperatur, gefolgt von einer 2-minütigen Inkubation bei 98 °C.
3. Zentrifugieren Sie die Proben kurz in einer Mikrozentrifuge, bis sich die Reaktionen am Boden der Röhrchen befinden.
4.Verwenden Sie 1 μl Überstand als Matrize für eine 20 μl PCR-Reaktion, vorbereitet wie in Tabelle 3 beschrieben. Jeder Überstand, der nicht sofort verwendet werden soll, kann in ein neues Röhrchen überführt und bei -20 °C gelagert werden.
5. Verwenden Sie als Nächstes einen Thermo Scientific Piko 24-Well-Thermocycler und eine Thermo Scientific Piko PCR-Platte, um die PCR-Reaktionen unter den in Tabelle 4 beschriebenen Zyklusbedingungen durchzuführen. Auch hier können die PCR-Reaktionen auch in herkömmlichen PCR-Cyclern durchgeführt werden.
6. Fügen Sie nach der PCR 5 μl 5x Ladepuffer zur Reaktion hinzu und führen Sie eine Agarose-Gelelektrophorese mit 15 μl der resultierenden Mischung durch.
4. Repräsentative Ergebnisse
Direct Mouse Genotyping Kit |
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| K1025-200 | ApexBio | 200 rxns | 64 EUR |
Direct Mouse Genotyping Kit |
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| K1025-500 | ApexBio | 500 rxns | 112 EUR |
Direct Mouse Genotyping Kit Plus |
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| K1027-200 | ApexBio | 200 rxns | 68 EUR |
Direct Mouse Genotyping Kit Plus |
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| K1027-500 | ApexBio | 500 rxns | 116 EUR |
Mouse Direct PCR Kit (For Genotyping) |
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| B45012 | Bimake | 1ml*5 (500 ractions) | 336 EUR |
Mouse Direct PCR Kit (For Genotyping) |
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| B45013 | Bimake | 1ml*20 (2000 ractions) | 1038 EUR |
Mouse Direct PCR Kit (For Genotyping) |
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| B40013 | Bimake | 200 ractions | 250.8 EUR |
Mouse Direct PCR Kit (For Genotyping) |
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| B40015 | Bimake | 500 ractions | 490.8 EUR |
EzWay Direct ApoE Genotyping Kit |
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| K0568500 | KOMA BIOTECH | 50T | 670 EUR |
FastAmp® Plant Direct PCR & Genotyping Solution |
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| 4611 | Intact Genomics | 20mL | 156 EUR |
Mouse Genotyping Kit |
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| 20-abx09888920l | Abbexa |
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One Step Mouse Genotyping Kit |
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| PD101-01 | Vazyme | 200 rxn | 130.5 EUR |
One Step Mouse Genotyping Kit |
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| PD101-01-200rxns | Vazyme | 200 rxns | 135.13 EUR |
One Step U+ Mouse Genotyping Kit |
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| PD104-01 | Vazyme | 200 rxn | 327.6 EUR |
Genotyping Kit |
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| K1026-200 | ApexBio | 200 rxns | 64 EUR |
Genotyping Kit |
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| K1026-500 | ApexBio | 500 rxns | 112 EUR |
Fast Mouse Genotyping System |
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| TBS4033 | Tribioscience | 250RXNS | 198 EUR |
Powerpol HS 2X PCR Mix for Mouse Genotyping |
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| RK20737 | Abclonal | 1.250mL | 133.53 EUR |
TARGATT? Knock-in iPSC Genotyping Kit |
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| AST-1102 | Applied StemCell | 1 Kit | Ask for price |
SensiFAST Genotyping Lo-Rox Kit |
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| BIO-34005 | Bioline | 500 Reactions | Ask for price |
SensiFAST Genotyping Hi-Rox Kit |
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| BIO-35005 | Bioline | 500 Reactions | Ask for price |
HPV Genotyping Real-time PCR Kit |
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| TRI-J01M1 | TRI Biotech | 48T | 2142 EUR |
Fast Rat Genotyping System |
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| TBS4034 | Tribioscience | 250RXNS | 198 EUR |
TaqMan Genotyping Master Mix |
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| 4306A | Unibiotest | 5*1 mL | 300 EUR |
TaqMan Genotyping Master Mix |
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| 4306B | Unibiotest | 10*1 mL | 600 EUR |
castPCR Genotyping Master Mix |
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| 4310A | Unibiotest | 5*1 mL | 300 EUR |
castPCR Genotyping Master Mix |
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| 4310B | Unibiotest | 10*1 mL | 600 EUR |
Accuris 1 Hour Mammalian Genotyping Kit, 400 Reactions |
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| PR1300-MG-400 | Benchmark Scientific | 1 PC | 618.31 EUR |
Fast Zebrafish Genotyping System |
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| TBS4035 | Tribioscience | 250RXNS | 198 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for CFTR 508 |
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| Z-Path-GT-CFTR-508 | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for rs1024610 |
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| Z-Path-GT-rs1024610 | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for rs1024611 |
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| Z-Path-GT-rs1024611 | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for rs2020933 |
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| Z-Path-GT-rs2020933 | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for rs2288646 |
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| Z-Path-GT-rs2288646 | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for rs2395185 |
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| Z-Path-GT-rs2395185 | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for rs4148855 |
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| Z-Path-GT-rs4148855 | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for rs12979860 |
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| Z-Path-GT-IL28B-rs12979860 | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for rs11003125 |
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| Z-Path-GT-rs11003125 | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
quasa Real-time PCR Genotyping kit for BRAF (V600E) |
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| Z-Path-GT-QU-BRAF-V600E | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
quasa Real-time PCR Genotyping kit for JAK2(V617F) |
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| Z-Path-GT-QU-JAK2-617 | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
Accuris 1 Hour Mammalian Genotyping Kit, 80 Reactions |
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| PR1300-MG-80 | Benchmark Scientific | 1 PC | 141.83 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for Prothrombin |
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| Z-Path-GT-Prothrombin-G20210A | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
TM 2x Genotyping PCR Ready Mix |
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| TBS4003 | Tribioscience | 2.5 ml | 130 EUR |
SensiFAST Genotyping Lo-ROX Mix |
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| BIO-34020 | Bioline | 2000 rxns | Ask for price |
SensiFAST Genotyping Hi-ROX Mix |
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| BIO-35020 | Bioline | 2000 rxns | Ask for price |
PaxView® HPV 20 Genotyping MPCR-ULFA Kit |
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| V0324F | PaxGenBio Ltd | 48T | 288 EUR |
PaxView® HPV 20 Genotyping MPCR-ULFA Kit |
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| V0324N | PaxGenBio Ltd | 96T | 576 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for hemochromatosis |
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| Z-Path-GT-HFE | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for FactorV Leiden |
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| Z-Path-GT-FactorVLeiden | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for IL23R codon 381 |
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| Z-Path-GT-IL23R-R381Q | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for DDC codon M217V |
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| Z-Path-GT-DDC-M217V | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for GABBR2 codon 421 |
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| Z-Path-GT-GABBR2-421 | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for MBL2 codon G57E |
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| Z-Path-GT-MBL2-G57E | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for MBL2 codon R52C |
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| Z-Path-GT-MBL2-R52C | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
HPV (6/11/16/18) Genotyping Real-Time PCR Kit |
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| TRI-J24M1 | TRI Biotech | 48T | 587.16 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for ABL1 codon E255K |
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| Z-Path-GT-ABL1-E255K | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for ABL1 codon E255V |
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| Z-Path-GT-ABL1-E255V | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for ABL1 codon T315A |
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| Z-Path-GT-ABL1-T315A | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for ABL1 codon T315I |
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| Z-Path-GT-ABL1-T315I | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
snpsig Real-time PCR Genotyping kit for ABL1 codon V299L |
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| Z-Path-GT-ABL1-V299L | Novacyt Group | 50 tests | 808 EUR |
Accuris 1 Hour Mammalian Genotyping Kit, Sample, 8 reactions |
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| PR1300-MG-S | Benchmark Scientific | 1 PC | 9.68 EUR |
2x Genotyping PCR Ready Master Mix (250 x 20µL rxn) |
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| T403 | 101Bio | 250 rxn | 179 EUR |
2x Genotyping PCR Ready Master Mix (250 x 20µL rxn) |
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| T403M | 101Bio | 125 rxn | 99 EUR |
2x Genotyping PCR Ready Master Mix (250 x 20µL rxn) |
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| T403S | 101Bio | 50 rxn | 49 EUR |
order of previously designed custom snpsig genotyping assay |
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| Z-GT-CustomGOI-Inv | Novacyt Group | 50 rxns | 212 EUR |
Hemochromatosis Genotyping Kit RT PCR test for detection of His63Asp, Ser65Cys, Cys282Tyr |
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| HM-1-50-T | Sacace Biotechnologies | 60 | 763 EUR |
CFTR Genetics Real-TM Genotyping NEW Real Time PCR kit for detection of 8 most common CFTR gene mutations: |
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| H943-48FRT | Sacace Biotechnologies | 48 | 837.12 EUR |
HPV genotypes 14 Real-TM Quant Real Time PCR test for quantitative detection and genotyping of HPV (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 and 68) |
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| V67-100FRT | Sacace Biotechnologies | 100 | 1571.78 EUR |
HPV genotypes 21 Real-TM Quant Real Time PCR test for quantitative detection and genotyping of HPV (6, 11, 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 44, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82) |
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| V21-100FRT | Sacace Biotechnologies | 96 | 2594.2 EUR |
Avian A Screening & Avian H5N1 Typing FRT Real Time PCR test for detection of Avian A virus and genotyping for H5N1 |
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| R-V33-FRT | Sacace Biotechnologies | 50 | 913.42 EUR |
HPV 14 Screen & 16,18,45 Typing Real-TM Quant Real Time PCR test for quantitative detection of 14 HPV (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 and 68) and genotyping of HPV 16, 18, 45 |
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| V31-100-F-FRT | Sacace Biotechnologies | 100 | 1325.44 EUR |
Mouse tissue direct PCR kit |
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| EP033 | ELK Biotech | 50T | 125 EUR |
Mouse tissue direct PCR kit |
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| EP033-200T | ELK Biotech | 200T | 125 EUR |
Mouse tissue direct PCR kit |
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| EP033-50T | ELK Biotech | 50T | 40 EUR |
Mouse Tissue Direct PCR Kit |
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| RK20736 | Abclonal | 100RXN | 149.88 EUR |
EzWay Mouse Tail Direct PCR Kit |
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| K0568600 | KOMA BIOTECH | 1set | 188 EUR |
Mouse Tissue Direct PCR Kit (With Dye) |
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| 10185ES50 | Yeasen Biotechnology | 50T | 65 EUR |
Mouse Tissue Direct PCR Kit (With Dye) |
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| 10185ES70 | Yeasen Biotechnology | 200T | 235 EUR |
anti-HCV NS5a rabbit polyclonal antibody directed against genotype 2A |
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| MBS485096-01mg | MyBiosource | 0.1mg | 300 EUR |
anti-HCV NS5a rabbit polyclonal antibody directed against genotype 2A |
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| MBS485096-1mg | MyBiosource | 1mg | 1300 EUR |
anti-HCV NS5a rabbit polyclonal antibody directed against genotype 2A |
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| MBS485096-5x1mg | MyBiosource | 5x1mg | 5795 EUR |
Allele-In-One Mouse Tail Direct PCR Kit |
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| ABP-PP-MT02100 | Allele Biotech | 100 RXNS | Ask for price |
Allele-In-One Mouse Tail Direct PCR Kit |
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| ABP-PP-MT02500 | Allele Biotech | 500 RXNS | Ask for price |
Direct WGA Kit |
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| PCR-382L | Jena Bioscience GmbH | 100reactions x 20 µl | 566.6 EUR |
Direct WGA Kit |
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| PCR-382S | Jena Bioscience GmbH | 20reactions x 20 µl | 141.8 EUR |
Direct Blood PCR Kit |
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| E0950-01 | EURx | 100reactions | 69.76 EUR |
Direct Blood PCR Kit |
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| E0950-02 | EURx | 500reactions | 277.95 EUR |
Direct Plant PCR Kit |
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| E0960-01 | EURx | 100reactions | 55.59 EUR |
Direct Plant PCR Kit |
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| E0960-02 | EURx | 500reactions | 251.79 EUR |
Direct Blood PCR Kit |
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| MBPCR171-100R | EWC Diagnostics | 1 unit | 267.52 EUR |
Direct Blood PCR Kit |
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| MBPCR171-10R | EWC Diagnostics | 1 unit | 71.73 EUR |
Plant Direct PCR Kit |
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| PD105-00-10rxns | Vazyme | 10 rxns | 1.09 EUR |
Plant Direct PCR Kit |
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| PD105-01 | Vazyme | 50 rxn (50 μl/rxn) | 202.8 EUR |
Plant Direct PCR Kit |
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| PD105-02 | Vazyme | 200 rxn (50 μl/rxn) | 159.5 EUR |
Plant Direct PCR Kit |
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| PD105-02-200rxns | Vazyme | 200 rxns | 165.16 EUR |
Direct Tissue PCR Kit |
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| E0940-01 | EURx | 100reactions | 55.59 EUR |
Direct Tissue PCR Kit |
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| E0940-02 | EURx | 500reactions | 251.79 EUR |
Direct PCR Complete Kit |
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| S700 | GeneOn | 100 rcs | 159.6 EUR |
Direct PCR Complete Kit |
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| S700-2 | GeneOn | 5x100 rcs | 628.8 EUR |
Direct Bilirubin Assay Kit |
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| abx098425-Hitachi7020R150ml4R250ml1 | Abbexa | Hitachi 7020; R1: 50ml×4 R2: 50ml×1 | 266.4 EUR |
Direct Bilirubin Assay Kit |
|||
| abx098425-Hitachi7060R190ml2R245ml1 | Abbexa | Hitachi 7060; R1: 90ml×2 R2: 45ml×1 | 266.4 EUR |
Direct Bilirubin Assay Kit |
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| abx098425-Toshiba120R150ml4R250ml1 | Abbexa | Toshiba 120; R1: 50ml×4 R2: 50ml×1 | 266.4 EUR |
Direct Bilirubin Assay Kit |
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| abx098425-UniversalR160ml2R230ml1 | Abbexa | Universal; R1: 60ml×2 R2: 30ml×1 | 284.4 EUR |
Direct Bilirubin Assay Kit |
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| abx294061-100g | Abbexa | 100 µg | Ask for price |
Direct Bilirubin Assay Kit |
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| abx294061-20g | Abbexa | 20 µg | 400 EUR |
Direct Bilirubin Assay Kit |
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| abx294061-50g | Abbexa | 50 µg | Ask for price |
Allele-In-One Mouse Tail Direct Lysis Buffer |
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| ABP-PP-MT01100 | Allele Biotech | 100 RXNS | Ask for price |
Allele-In-One Mouse Tail Direct Lysis Buffer |
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| ABP-PP-MT01500 | Allele Biotech | 500 RXNS | Ask for price |
Blood Direct PCR Kit V2 |
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| PD103-01 | Vazyme | 50 rxn | 51.41 EUR |
Blood Direct PCR Kit V2 |
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| PD103-02 | Vazyme | 200 rxn | 188.5 EUR |
EzWay Plant Direct PCR Kit |
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| K0568700 | KOMA BIOTECH | 1set | 188 EUR |
Mouse Direct High-Density-Lipoprotein Cholesterol (HDL-C) ELISA Kit |
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| MBS3806172-10x96StripWells | MyBiosource | 10x96-Strip-Wells | 6725 EUR |
Mouse Direct High-Density-Lipoprotein Cholesterol (HDL-C) ELISA Kit |
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| MBS3806172-48StripWells | MyBiosource | 48-Strip-Wells | 550 EUR |
Mouse Direct High-Density-Lipoprotein Cholesterol (HDL-C) ELISA Kit |
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| MBS3806172-5x96StripWells | MyBiosource | 5x96-Strip-Wells | 3420 EUR |
Mouse Direct High-Density-Lipoprotein Cholesterol (HDL-C) ELISA Kit |
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| MBS3806172-96StripWells | MyBiosource | 96-Strip-Wells | 765 EUR |
Direct Red 80 |
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| MBS5786703-1g | MyBiosource | 1g | 145 EUR |
Direct Red 80 |
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| MBS5786703-5mg | MyBiosource | 5(mg | 145 EUR |
Direct Red 80 |
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| MBS5786703-5x1g | MyBiosource | 5x1g | 500 EUR |
Direct Red 80 |
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| MBS5786703-5x5mg | MyBiosource | 5x5mg | 500 EUR |
Direct Red 80 |
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| TD0098-10mg | TargetMol Chemicals | 10mg | Ask for price |
Direct Red 80 |
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| TD0098-1g | TargetMol Chemicals | 1g | Ask for price |
Direct Red 80 |
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| TD0098-1mg | TargetMol Chemicals | 1mg | Ask for price |
Direct Red 80 |
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| TD0098-50mg | TargetMol Chemicals | 50mg | Ask for price |
Direct Red 80 |
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| TD0098-5mg | TargetMol Chemicals | 5mg | Ask for price |
Direct Blue 71 |
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| D494318 | Toronto Research Chemicals | 2.5g | 68 EUR |
Direct Blue 1 |
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| T2194-10mg | TargetMol Chemicals | 10mg | Ask for price |
Direct Blue 1 |
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| T2194-1g | TargetMol Chemicals | 1g | Ask for price |
Direct Blue 1 |
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| T2194-1mg | TargetMol Chemicals | 1mg | Ask for price |
Direct Blue 1 |
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| T2194-50mg | TargetMol Chemicals | 50mg | Ask for price |
Direct Blue 1 |
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| T2194-5mg | TargetMol Chemicals | 5mg | Ask for price |
Direct Black 38 |
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| HY-D0256 | MedChemExpress | 100mg | 129.6 EUR |
Direct Green 6 |
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| MBS5781130-INQUIRE | MyBiosource | INQUIRE | Ask for price |
Direct Black 38 |
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| MBS5754793-100mg | MyBiosource | 100mg | 145 EUR |
Direct Black 38 |
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| MBS5754793-5x100mg | MyBiosource | 5x100mg | 500 EUR |
Direct Black 38 |
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| T15135-10mg | TargetMol Chemicals | 10mg | Ask for price |
Direct Black 38 |
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| T15135-1g | TargetMol Chemicals | 1g | Ask for price |
Direct Black 38 |
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| T15135-1mg | TargetMol Chemicals | 1mg | Ask for price |
Direct Black 38 |
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| T15135-50mg | TargetMol Chemicals | 50mg | Ask for price |
Direct Black 38 |
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| T15135-5mg | TargetMol Chemicals | 5mg | Ask for price |
Direct Green 6 |
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| T31526-10mg | TargetMol Chemicals | 10mg | Ask for price |
Direct Green 6 |
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| T31526-1g | TargetMol Chemicals | 1g | Ask for price |
Direct Green 6 |
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| T31526-1mg | TargetMol Chemicals | 1mg | Ask for price |
Direct Green 6 |
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| T31526-50mg | TargetMol Chemicals | 50mg | Ask for price |
Direct Green 6 |
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| T31526-5mg | TargetMol Chemicals | 5mg | Ask for price |
Direct Violet 1 |
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| 596135 | MedKoo Biosciences | 25.0g | 230 EUR |
Direct Yellow 26 |
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| 464247 | MedKoo Biosciences | 10.0mg | Ask for price |
Direct Yellow 11 |
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| D494828 | Toronto Research Chemicals | 10g | 800 EUR |
PCP Direct ELISA |
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| GWB-BQK187 | GenWay Biotech | 96 Well Plate | Ask for price |
Direct Violet 1 |
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| MBS5765613-100mg | MyBiosource | 100mg | 245 EUR |
Direct Violet 1 |
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| MBS5765613-10mg | MyBiosource | 10mg | 145 EUR |
Direct Violet 1 |
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| MBS5765613-200mg | MyBiosource | 200mg | 315 EUR |
Direct Violet 1 |
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| MBS5765613-25mg | MyBiosource | 25mg | 165 EUR |
Direct Violet 1 |
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| MBS5765613-50mg | MyBiosource | 50mg | 195 EUR |
Direct Violet 1 |
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| T20033-10mg | TargetMol Chemicals | 10mg | Ask for price |
Direct Violet 1 |
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| T20033-1g | TargetMol Chemicals | 1g | Ask for price |
Direct Violet 1 |
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| T20033-1mg | TargetMol Chemicals | 1mg | Ask for price |
Direct Violet 1 |
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| T20033-50mg | TargetMol Chemicals | 50mg | Ask for price |
Direct Violet 1 |
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| T20033-5mg | TargetMol Chemicals | 5mg | Ask for price |
Direct DNA Extraction Kit (Bacteria) |
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| 61500 | Norgen Biotek Corp | 50 Preps | 53.4 EUR |
Renin ELISA (Direct) |
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| GWB-013014 | GenWay Biotech | 96 Tests | Ask for price |
FastAmp® Plant Direct PCR Kit |
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| 4615 | Intact Genomics | 1/EA | 396 EUR |
Probe Direct SuperMix |
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| abx461057-1096tests | Abbexa | 10 × 96 tests | Ask for price |
Probe Direct SuperMix |
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| abx461057-596tests | Abbexa | 5 × 96 tests | 2800 EUR |
Bei der dCAPS-
Technik wird die Restriktionsstelle innerhalb des interessierenden SNP entweder eingeführt oder zerstört, indem ein PCR-Primer mit einer oder mehreren Fehlpaarungen mit der Ziel-DNA verwendet wird. Die Genotypisierung von Arabidopsis-Pflanzenindividuen wurde mit der dCAPS-Technik direkt aus Blattstanzen durchgeführt. Die amplifizierten Produkte wurden verdaut und die resultierenden Fragmente, die den Genotyp jedes Individuums enthüllten, wurden durch Gelelektrophorese analysiert