hsa-mir-521 Echtzeit-RT-PCR-Erkennungskit
Tristan
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Das miRNA Real-Time RT-PCR Detection Kit ist ein benutzerfreundliches Kit, das den schnellen Nachweis von miRNAs durch Reverse-Transkriptase-Polymerase-Kettenreaktion ermöglicht. Dieses Instrument bietet Empfindlichkeit, Komfort und Genauigkeit und bietet nachweislich eine höhere Spezifität als herkömmliche PCR und RT-PCR. Das Biocare Bio-Rad cDNA-Synthesekit (Kat.-Nr. AX4010B) ist eine Methode zur Herstellung von cDNA aus RNA, die aus biologischen Proben in weniger als einer Stunde extrahiert wurde.
Das Synthesekit ermöglicht sowohl die reverse Transkription als auch die Amplifikation von mRNA durch PCR sowie die selektive Anreicherung von RNA in der cDNA-Bibliothek. Das Kit kann verwendet werden, um cDNA aus RNA zu synthetisieren, die aus einer beliebigen biologischen Probe wie Gewebe oder Zellen extrahiert wurde, wenn die absolute DNA-Menge erwünscht ist.
Was ist eine miRNA?
Was ist miRNA-Echtzeit-RT-PCR?
Wie wird miRNA-Echtzeit-RT-PCR durchgeführt?
Was sind die Vorteile der miRNA-Echtzeit-RT-PCR?
Was ist eine miRNA?
Eine miRNA (miRNA-Molekül) ist ein kleines, nichtkodierendes RNA-Molekül, das eine Rolle bei der Regulierung der Genexpression spielt. miRNAs können in allen Zellen gefunden werden und spielen eine Rolle bei der Kontrolle der Art und Weise, wie Gene exprimiert werden. miRNAs können als Marker zur Abschätzung des Expressionsniveaus von Zielgenen verwendet werden.
Was ist miRNA-Echtzeit-RT-PCR?
MiRNA-Echtzeit-RT-PCR ist eine Technik, die miRNAs als Biomarker verwendet, um die mRNA-Expressionsniveaus von Zielgenen zu messen. Der Assay verwendet einen Oligonukleotid-Primer, der auf die für die miRNA kodierende Sequenz abzielt, und ein auf Reverse-Transkription-PCR (RT) basierendes Verfahren zur Amplifikation des Zielgens. Das resultierende Produkt wird dann unter Verwendung eines Echtzeit-PCR-Systems analysiert.
Wie wird miRNA-Echtzeit-RT-PCR durchgeführt?
Das Testverfahren beginnt mit dem Mischen der entsprechenden Menge an Taq-Polymerase, genomischer DNA und Primern in ein Röhrchen. Die PCR-Mischung wird dann denaturiert und für 10 Minuten auf 98 °C erhitzt. Die PCR-Reaktion wird durch Zugabe von 1 µl der Proben-DNA, die als Matrize dient, zum Reaktionsgemisch gestartet; Es folgen 30 Denaturierungszyklen bei 98℃ für 5 Minuten, Annealing bei 45℃ für 2 Minuten und Extension bei 72℃ für 2 Minuten . Ein letzter Extensionsschritt wird bei 72℃ für 10 Minuten durchgeführt. Nach dem letzten Verlängerungsschritt wird das PCR-Produkt mittels Phenol/Chloroform-Extraktion extrahiert. Die Reaktionsprodukte werden in Echtzeit mit dem TaqMan® FlexRealTM Real-Time PCR-System analysiert
Wo sind die besten Stellen im Körper, um miRNA-Spiegel zu messen?
Der miRNA-Spiegel in einem bestimmten Gewebe kann mit einer Reihe verschiedener Techniken bestimmt werden, aber die beliebteste Methode zur Messung des miRNA-Spiegels ist die Echtzeit-RT-PCR. Auf dem Markt sind einige verschiedene miRNA-Nachweiskits erhältlich. Welches ist das Beste für Ihre Anforderungen?
Beim miRNA-Nachweis sind einige Dinge zu beachten. Erstens, nach welcher Art von miRNA suchen Sie? Es gibt über 200 verschiedene Arten von miRNAs, und jede kann einzigartige Auswirkungen auf die Zelle haben. Wenn Sie also feststellen möchten, ob ein bestimmtes Gen fehlreguliert ist oder nicht, dann ist ein spezifisches miRNA-Nachweiskit möglicherweise nicht die beste Option. Zweitens, welche Art von Assay möchten Sie verwenden? Einige Kits beinhalten direkte Sequenzierungsfunktionen, während andere nur Quantifizierungsdaten liefern. Und schließlich, wo möchten Sie die miRNA-Werte messen? Es gibt eine Vielzahl verschiedener Gewebe, auf die mit RT-PCR abgezielt werden kann, daher ist es wichtig, das Kit auszuwählen, das für Ihre Anforderungen am besten geeignet ist.
Hier sind fünf der besten Orte, um den miRNA-Spiegel zu messen:
1) Leber: Die Leber ist für das Filtern und Entgiften toxischer Chemikalien verantwortlich, daher können höhere miRNA-Konzentrationen einem effizienteren Entgiftungsprozess entsprechen. 2) Gefäßsystem: Die Blutgefäße sind für den Transport von Nährstoffen zum Herzen, Gehirn und anderen lebenswichtigen Dingen verantwortlich Organe.3) Niere:
Die Niere ist das Hauptfiltrationsorgan im menschlichen Körper; es reguliert den Wasserhaushalt, hält Elektrolyte aufrecht und entfernt Abfallprodukte aus dem Blut.4) Haut: Wir alle wissen, dass die Haut Melanozyten enthält (ein Zelltyp, der Melanin produziert), aber was Sie vielleicht nicht wissen, ist, dass diese Zellen auch miRNAs produzieren !5) Knochen: Zellen im Knochengewebe helfen, den Kalzium- und Phosphorspiegel im Blut zu regulieren.
Wie kann ich das MiRNA Real-Time RT-PCR Detection Kit verwenden, um miRNAs in einer Probe zu erkennen und zu vergleichen?
Das MiRNA Real-Time RT-PCR Detection Kit kann ein nützliches Werkzeug zum Nachweis und Vergleich von miRNAs in einer Probe sein. Dieses Kit wurde entwickelt, um miRNAs schnell und einfach nachzuweisen und zu quantifizieren, was es zu einer wertvollen Ressource für Forscher macht, die die Rolle von miRNAs in biologischen Prozessen untersuchen. Sowohl für die miRNA- als auch für die mRNA-Nachweiskits führen Sie die Schritt-für-Schritt-Protokolle durch den Prozess der Durchführung eines Assays. Die Protokollhefte umfassen: ein Primer-Sequenzierungsprotokoll zum Nachweis von miRNAs (miRDirect RT-PCR Kit) und einen Membranvorläufer-Assay mit reverser Transkriptions-PCR (miRTaq II PCR Kit). Zusätzlich gibt es ein qRT-PCR-Protokoll zur Quantifizierung spezifischer Gene (qRT-PCR Detection Kit) und ein Western-Blot-Protokoll zum Nachweis von Proteinen oder Proteinkomplexen (Western Blot Detection Kit).
Fazit
miRNA ist eine Art kleines RNA-Molekül, das zur Diagnose und Behandlung von Krankheiten verwendet werden kann. miRNA-Diagnostika befinden sich derzeit in der Entwicklung für viele verschiedene Krebsarten, darunter Lungenkrebs, Bauchspeicheldrüsenkrebs und multiples Myelom. miRNAs spielen eine wichtige Rolle bei der Regulierung der Genexpression. Wenn wir also verstehen, wie diese Moleküle bei Krankheiten fehlreguliert werden, können wir mit der Entwicklung von Behandlungen beginnen, die auf bestimmte Signalwege abzielen und Patienten helfen, länger gesünder zu leben. Überblick über den Krebsdiagnostikmarkt von Roche
Roche ist eines der größten Pharmaunternehmen der Welt und führend in der Entwicklung neuer Klassen von Krebstherapien. Mit Hauptsitz in Basel, Schweiz, ist Roche seit 1929 mit mehr als 15.000 Mitarbeitern tätig. Im Jahr 2012 erwirtschaftete Roche einen Umsatz von 47 Milliarden US-Dollar.
hsa-mir-521 Real-time RT-PCR Detection Kit |
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Roche entwickelt hochwertige Medikamente, die die Lebensqualität der Patienten verbessern und gleichzeitig die Gesundheitskosten senken. Das Unternehmen ist besonders bekannt für seine Medikamente, die auf onkologische Indikationen wie Krebs, Stoffwechselstörungen und Infektionskrankheiten abzielen. Das Portfolio von Roche umfasst über 30 verschiedene Medikamente und mehrere Marken, darunter: Avastin®, Cordicin®, Genentech®, Herceptin®, Procysbi®